OCT（Optimal Cutting Temperature）包埋是一种常用于冷冻组织切片的包埋方法，主要适用于免疫荧光染色、分子生物学研究及部分组织学分析。OCT包埋剂是一种水溶性化合物，能够提供良好的支持力，使组织在冷冻过程中保持形态完整，并便于后续冷冻切片操作。相比传统石蜡包埋，OCT包埋无需脱水和透明化处理，能更好地保留蛋白质、RNA及抗原表位的完整性，特别适用于对抗原性要求较高的实验，如免疫荧光或免疫组化分析。
OCT包埋的基本步骤包括样本采集、包埋剂浸润、快速冷冻和储存。组织包埋后，可在-20℃至-80℃保存较长时间，具体存储条件视实验要求而定。包埋样本可用于常规冷冻切片机（冰冻切片机）进行切片，切片后可直接进行染色或其他后续实验。
样本采集
组织样本应新鲜取材，尽可能避免缺血缺氧影响，采集后应立即处理。对于较大的组织块，建议修整至适当大小（一般不超过1 cm³），以便充分浸润OCT包埋剂并提高冷冻速率。包埋剂浸润
将组织放入预冷的OCT包埋剂中，确保组织完全被包埋剂覆盖，并尽量避免气泡产生，以保证冷冻切片的质量。冷冻
样本浸润后需立即快速冷冻，可采用以下方法之一：液氮冷冻（推荐）：将包埋后的组织置于预冷的液氮蒸汽中（非直接浸泡液氮）速冻，以减少冰晶形成对组织结构的影响。
干冰-异丙醇混合物冷冻：将包埋好的样本放置于干冰和异丙醇混合物中冷冻，适用于一般实验室条件。
-80℃冰箱预冷冻：适用于较低要求的实验，但可能形成较大冰晶，影响组织结构。
固定（可选）
对于某些特殊实验，样本可在包埋前进行预固定（如使用4%多聚甲醛），但通常OCT包埋适用于新鲜组织，不建议预固定，以避免固定剂对抗原性和分子完整性的影响。
