染色概述
油红O(Oil Red O)大体染色是一种用于大块组织或整个器官脂质检测的染色方法,能够直观地显示组织中脂质沉积的情况,常用于代谢性疾病研究,如脂肪肝、动脉粥样硬化等。该方法适用于未脱水的组织块,通过油红O的脂溶性特点,使脂质呈现红色,在肉眼或显微镜下均可观察到脂质分布。
染色原理
油红O是一种疏水性染料,能够溶解并结合中性脂质(如甘油三酯和胆固醇酯)。在大体组织染色过程中,油红O染料渗透进入组织并与脂滴结合,使组织中的脂质部分显现出鲜明的红色,而非脂质区域保持原本颜色或经苏木精复染后呈蓝色,从而形成明显的对比度。
染色特点
适用于大体组织或完整器官:能够直观观察脂质在整个组织中的分布,而不仅限于局部组织切片。
脂质染色特异性高:能够准确显示组织内脂肪的积累情况,不易受到其他组织成分的干扰。
保持组织完整性:无需石蜡包埋和切片操作,可直接在固定后进行染色,减少组织处理带来的损失。
快速且可视化:相比组织切片染色,大体染色可以更直观地观察脂质的整体分布,适用于快速评估实验模型。
应用领域
脂肪肝研究:用于检测肝脏中脂肪变性情况,评估疾病进展。
动脉粥样硬化研究:用于观察血管壁的脂质沉积情况,评估病变程度。
代谢性疾病研究:用于分析肥胖、小鼠脂代谢模型等实验中脂质在组织中的沉积情况。
药物或基因干预研究:评估药物或基因治疗对脂质代谢的影响。
样本应为未脱脂处理的冰冻切片或新鲜组织,以确保脂质成分的完整保留。组织固定可选用4% PFA,但需避免使用醇类固定剂,以防脂质溶解。冰冻切片的厚度通常为8-12 μm,可根据实验需求适当调整。切片后建议直接进行染色或低温(-20℃)保存,避免脂质降解影响染色效果。
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