染色概述
过碘酸-Schiff(PAS)染色是一种广泛用于糖原、糖蛋白、黏多糖和基底膜结构显色的组织化学染色方法。在视网膜研究中,PAS染色可用于染色血管基底膜、毛细血管壁和视网膜神经胶质细胞,特别适用于研究糖尿病视网膜病变、血管异常及其他眼部病理改变。
染色原理
PAS染色利用过碘酸(HIO₄)氧化组织中的1,2-醇基,使其形成醛基,随后醛基与Schiff试剂(复合亚硫酸品红)反应,生成稳定的紫红色产物。这一过程可以特异性地标记糖蛋白和基底膜结构,使其在显微镜下清晰可见。
染色特点
高选择性:可特异性标记糖类和基底膜,尤其适用于研究血管壁结构。
良好对比度:染色后血管基底膜和糖蛋白呈紫红色,背景组织相对较浅,有助于结构辨别。
稳定性高:染色后的样本具有较好的组织保存性,适用于长期存档和对比研究。
适用于视网膜微血管分析:广泛用于研究糖尿病视网膜病变、视网膜血管病变及眼部炎症性疾病。
应用领域
糖尿病视网膜病变:评估微血管基底膜增厚、血管闭塞及病变发展情况。
视网膜血管病变研究:包括高血压视网膜病变、炎症性血管病变等。
眼部病理分析:检测视网膜毛细血管和神经胶质细胞的结构变化。
发育生物学研究:分析眼部血管系统的发育过程及其病理改变。
样本需为视网膜血管网铺片,推荐使用4% PFA固定,固定时间12-24小时,以保持血管结构完整。视网膜组织需剥离后进行血管平铺处理,并充分展开贴附于玻片上,以便均匀染色。固定后的组织可进一步水洗、脱水,并进行PAS染色。避免使用醇类固定剂,以免影响染色效果。
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