一、产品简介
本产品采用新一代逆转录酶,具备卓越的热稳定性和高逆转录效率,可在 50℃ 条件下高效催化反应。此外,内含的 dsDNase 可有效去除 RNA 模板中残留的基因组 DNA,确保后续 qPCR 结果更加精准,无需额外设计跨内含子的引物。利用本产品逆转录获得的 cDNA 可直接应用于下游 qPCR 检测,简化实验流程,提高实验效率。
二、产品特点
简便快捷:基因组去除与逆转录可一步/两步完成。仅需加入RNA模板和水即可进行逆转录反应;
热稳定性强:50℃反应,提高了RNA模板复杂二级结构的逆转录效率;
逆转录效率高:与市面上同类产品对比,本产品的逆转录效率更高。
三、适用范围
本产品适用于动物、植物及微生物RNA模板的第一链cDNA合成反应,经本产品逆转录得到的产物可兼容下游的染料法qPCR检测和探针法qPCR检测。
20℃可以保存12个月。
1) 模板 RNA 提取失败或存在降解。建议在逆转录反应前一定要电泳验证 RNA 的完整性,提取RNA 后尽快进行逆转录及 qPCR 操作;
2) 基因表达量较低。可适当提高模板RNA用量;
3) 逆转录体系、程序或加样等操作不当。建议按照说明书规范操作。
1) RNA 模板中含有 gDNA。建议逆转录前进行去基因组反应或引物跨内含子设计;
2) qPCR 引物特异性差。重新设计特异性较好的引物,可通过常规 PCR检测引物特异性;
3) 引物过量。引物过量可能形成引物二聚体,建议按说明书推荐用量添加;
4) 体系可能存在污染。设置无模板阴性对照(NTC)检查体系是否存在污染,若存在污染,建议更换试剂及耗材,使用核酸清洁剂清洁(目录号:KN709)操作台面及实验环境中的气溶胶污染。
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