番红固绿染色是一种常用于组织学和病理学中的染色方法，主要用于染色软骨组织中的胶原纤维、细胞外基质等结构。该染色方法利用番红（Safranin O）和固绿（Fast Green）这两种染料对软骨中的不同成分进行选择性染色，能够清晰地区分软骨基质中的糖胺聚糖和胶原纤维。番红固绿染色法通常用于软骨的病理学研究，尤其是在研究软骨的变性、退化以及病理变化时，能够清楚地观察到软骨组织的细微结构变化。
番红（Safranin O）：主要用于染色软骨基质中的糖胺聚糖（如硫酸软骨素），并呈现红色或橙红色。
固绿（Fast Green）：用于染色软骨中的胶原纤维和其他结缔组织，并呈现绿色。 通过这两种染料的组合，能够有效地区分软骨组织的不同成分，使得软骨基质和胶原纤维在显微镜下具有明显的颜色对比，便于研究人员对软骨的结构、形态及病理变化进行详细分析。
固定液要求：软骨组织通常使用4% PFA（多聚甲醛）进行固定。固定后的样本应保持组织完整，避免脱水过度。
切片厚度要求：通常需要将软骨组织切片成5-10μm的薄片，以确保染色剂能有效渗透并均匀染色。
