一、应用:骨组织快脱主要用于对时间要求较高的组织学研究,如快速病理诊断、常规HE染色及部分免疫组化实验。其特点是脱钙速度快,能在短时间内去除骨组织中的矿物质,使组织适合切片和染色,适用于急诊病理分析或高通量样本处理。
二、介绍:快脱法通常采用酸性脱钙液(如甲酸、盐酸或硝酸等),其高效的溶解能力可在数小时至几天内完成脱钙。然而,酸性脱钙可能会影响细胞成分及蛋白结构,因此不适用于对抗原、核酸保存要求较高的实验,如免疫组化、原位杂交或分子生物学研究。
本公司采用优化的快脱液,在保证脱钙效率的同时,最大程度保护组织结构,确保后续实验(如HE染色、IHC及IF)不受影响。快脱过程中,需严格控制脱钙时间及溶液浓度,以减少组织过度脱钙导致的形态学损伤。
脱钙时间(经供参考):
小鼠(Mouse)快脱时间
股骨、胫骨(≤5mm厚):6-12小时
颅骨、下颌骨(≤3mm厚):4-8小时
椎骨(单块,≤4mm厚):6-12小时
脊柱(整段):1-2天
尾椎(单节):4-8小时;(整段)1-2天
膝关节、髋关节(含软骨):12-24小时
长骨(未成骨化胚胎组织):2-4小时
大鼠(Rat)快脱时间
股骨、胫骨(≤5mm厚):12-24小时
颅骨、下颌骨(≤3mm厚):8-12小时
椎骨(单块,≤4mm厚):12-24小时
脊柱(整段):2-3天
尾椎(单节):8-12小时;(整段)2-3天
膝关节、髋关节(含软骨):24-72小时
长骨(未成骨化胚胎组织):4-6小时
组织大小:建议骨组织厚度≤5mm,以确保脱钙均匀,避免脱钙不完全影响切片质量。
固定处理:样本应先使用4%多聚甲醛(RG-GD-01)固定24-48小时,以维持组织结构和细胞形态。
脱钙前冲洗:固定后需用PBS或蒸馏水充分冲洗,以去除残留固定液,减少对脱钙过程的干扰。
脱钙液比例:组织与EDTA脱钙液的体积比建议≥1:20,并定期更换新鲜溶液,以保证脱钙效率。
由于不同组织的密度、矿化程度及结构特性各异,其处理方式存在差异,因此脱钙时间也有所不同。具体脱钙时间需根据实验需求及组织特点灵活调整,并在每次实验中结合实际情况进行计算和评估,以确保最佳脱钙效果。
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